Родился в городе Буданов, Австро-Венгрия (ныне — Буданов, Украина). Родители — Ида и Борух Меер Страсберги в 1908 году эмигрировали в США.
В 1966 году основал Actors Studio West в Лос-Анджелесе. В 1969 году основал Театральный институт Ли Страсберга.
В 1931 году стал одним из основателей театрального коллектива Group Theatre. В 1949 году начал работать в школе актёрского мастерства Actors Studio в Нью-Йорке. В 1952 году стал её руководителем, обучение вёл по своей методике на основе системы Станиславского.